Cette hormone intervient dans le développement et le maintien des caractéristiques sexuelles masculines, telles que la croissance des organes génitaux externes, la production de spermatozoïdes, la croissance des poils du visage et du corps, la densité osseuse et la distribution des graisses. Chez les femmes, la testostérone est également impliquée dans la régulation du désir sexuel, de la masse musculaire et de la densité osseuse. 

La production de testostérone est régulée par un système complexe impliquant l'hypothalamus et l'hypophyse dans le cerveau, ainsi que les testicules et les ovaires. L'hormone lutéinisante (LH) et l'hormone folliculostimulante (FSH), sécrétées par l'hypophyse, stimulent la production de testostérone chez les hommes et les femmes. La production de testostérone suit un rythme circadien, avec des niveaux plus élevés le matin et des niveaux plus bas le soir. 

Les niveaux de testostérone ont tendance à diminuer avec l'âge chez les hommes, avec une diminution progressive à partir de l'âge adulte moyen.