Coloration de Gram.

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La coloration de Gram

La coloration de Gram est une méthode de coloration largement utilisée en microbiologie pour différencier les Bactéries en deux grands groupes : les Bactéries Gram positives et les Bactéries Gram négatives. Cette classification permet de différencier les bactéries en fonction de leur structure de paroi cellulaire, ce qui peut avoir des implications pour le diagnostic et le traitement des infections bactériennes. La coloration de Gram est nommée d'après le microbiologiste Hans Christian Gram, qui l'a développée en 1884.

La méthode de Gram.
Le processus de coloration de Gram implique plusieurs étapes :

• Fixation. - Les Bactéries sont d'abord fixées sur une lame de verre à l'aide de chaleur douce.
• Coloration au violet de gentiane. - La lame est ensuite immergée dans un colorant violet de gentiane. Ce colorant pénètre dans toutes les cellules bactériennes.
• Rinçage. - La lame est rincée à l'eau. Ce rinçage enlève l'excès de colorant, mais les cellules bactériennes restent colorées.
• Traitement au lugol. - La lame est ensuite traitée avec une solution de lugol (également appelée solution d'iode). Le lugol agit comme un fixateur de colorant, formant un complexe insoluble entre le violet de gentiane et le peptidoglycane dans la paroi cellulaire des bactéries.
• Rinçage à nouveau. - La lame est à nouveau rincée à l'eau. Ce rinçage élimine l'excès de lugol.
• Décoloration. - La lame est alors exposée à un agent de décoloration, généralement de l'alcool ou un mélange d'alcool et d'acétone. Ce processus élimine le colorant des Bactéries Gram négatives mais ne le retire pas des Bactéries Gram positives.
• Contre-coloration. - La lame est enfin immergée dans une solution de contre-coloration, généralement la fuchsine ou la safranine. Les Bactéries Gram négatives, maintenant dépourvues de violet de gentiane, sont colorées par cette contre-coloration, tandis que les Bactéries Gram positives conservent leur couleur violette.

Deux groupes de Bactéries.
Au terme de la coloration, les bactéries sont classées en fonction de leur réaction à la coloration de Gram : violettes (Gram positives) ou rouges/roses (Gram négatives). Cette distinction repose sur des différences dans la structure de la paroi cellulaire des bactéries, notamment la présence de peptidoglycane et la composition lipidique.

Bactéries Gram positives.
Les Bactéries Gram positives ont une paroi cellulaire épaisse composée principalement de peptidoglycane. Lorsqu'elles sont soumises à la coloration de Gram, elles retiennent le colorant violet-iodure de cristal et apparaissent donc de couleur violette ou bleue sous le microscope après la coloration. La paroi cellulaire épaisse des Bactéries gram positives les rend plus résistantes aux agents détergents et aux antibiotiques qui ciblent la paroi cellulaire. Les Bactéries gram positives incluent des genres comme Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus et Clostridium.

Bactéries Gram négatives.
Les Bactéries Gram négatives ont une paroi cellulaire moins épaisse, composée de peptidoglycane mais également d'une membrane externe riche en lipopolysaccharides (LPS). Lorsqu'elles sont soumises à la coloration de Gram, elles perdent le colorant violet-iodure de cristal lors de la décoloration et prennent ensuite la couleur du contre-colorant utilisé, généralement le safran ou la fuchsine, et apparaissent donc de couleur rouge ou rose sous le microscope après la coloration. La membrane externe des Bactéries gram négatives leur confère une résistance accrue à certains antibiotiques et à d'autres substances chimiques. es Bactéries gram négatives incluent des genres comme Escherichia coli, Salmonella, Pseudomonas et Vibrio.

Dictionnaire Les mots du vivant